实时荧光定量PCR扩增曲线蕴含基线期,指数扩增期,线性扩增期和扩增平台期,尺度的曲线应该呈典型的S型。不规定曲线能够凭据曲线的具体情况来分析:1)曲线呈斜线上升原因:热盖失灵或热盖没盖紧,导致控温禁绝、液体挥发。解决法子:更换仪器热盖或将热盖盖紧。图1 曲线呈斜线上升2)扩增曲线分成两段(断裂)图2扩增曲线分成两段(断裂)原因:基线的终点大于Ct值,通常是由于模板DNA浓度偏高,CT值< 15,而基线依然取3-15,其中蕴含部门扩增信号,导致曲线被压下去。解决步骤:减幼基线终点,至Ct值前4个循环,沉新分析数据。3)直线扩增曲线图3 某些样本出现直线扩增曲线原因:探针部门降解解决法子:建议更换试剂进行测试。4)曲线平台期下掉原因:盖子没盖紧解决法子:PCR反映管盖子盖上后,查抄盖子是否盖紧。图4 曲线平台期下掉