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要判断自己的PCR仪器是否正常，可从以下几方面思考：1. 仪器开关机，与软件衔接是否正常 。2. 仪器运行同样的尝试所必要的功夫是否跟平时一致，由此判断仪器的加热造冷？槭欠裾 。3. 曲线了局是否呈显著的S型，若曲线异常，如呈崎岖上升状，则可能是热盖问题，或者是荧光检测装置出现问题 。4. 若曲线的荧光值与平时相比，显著降低，则要思考是否必要更换仪器光源（尤其是卤素灯，其光源寿命约2000h） 。5. 若仪器某一孔或几孔的荧光值显著高于其他孔位，则必要思考仪器的孔槽或检测光路是否受到荧光传染，建议洗濯仪器孔槽后再进行测试 。
1）为了保障检测质量，临床PCR尝试室应有充分合理的空间，优良的照明和空调设备 。工作环境虽不是检测质量的直接原因，但宽敞舒服的尝试室环境将注定有利于检验质量的保障 。
2）合理有效地对仪器设备进行治理，定期做守护和校准，使其处于一个优良的状态 。例如，定期校准移液器，使其维持足够的正确度和精密度 。定期守护荧光定量PCR仪的光学系统和反映孔间温度差距，使其维持在优良状态和允许的领域内 。此表，还蕴含天平，离心理，冰箱等设备的治理 。
3）梦想的试剂：重要有内表两个成分，内涵成分蕴含标本处置步骤，用于核酸扩增的原资料及步骤学设计等 。表出成分蕴含试剂盒的运输和保留中的问题 。
4）尺度化操作流程：齐全的临床PCR法式由标本采集，运送，保留，编号，试剂筹备，核酸提取，扩增和产品检测，了局分析和汇报等诸多环节，成立科学和与本尝试室配套的SOP文件，严格按SOP进行操作 。
5）重要传染源和防传染措施：PCR的重要传染源有标本中的大量待测微生物，克隆质粒，大量存在尝试室中的特定微生物以及以前扩增产品的残留传染等 。这些都是尝试室最容易造成假阳性的传染 。因而，必须严格分区尝试室及遵守工作流程，使用化学清洁尝试台面，使用紫表线照射和UNG步骤解除扩增产品传染等等 。
6）进行室内和室间质量节造，室内质量节造能够确保尝试室室内测定质量的一致性，室间质量节造能够提供将尝试室测定情况与一室间和客观尺度进行回首性比力的数据 。
实时荧光定量PCR扩增曲线蕴含基线期，指数扩增期，线性扩增期和扩增平台期，尺度的曲线应该呈典型的S型 。不规定曲线能够凭据曲线的具体情况来分析：1）曲线呈斜线上升原因：热盖失灵或热盖没盖紧，导致控温禁绝、液体挥发 。解决法子:更换仪器热盖或将热盖盖紧 。图1 曲线呈斜线上升2）扩增曲线分成两段（断裂）图2扩增曲线分成两段（断裂）原因：基线的终点大于Ct值，通常是由于模板DNA浓度偏高，CT值< 15，而基线依然取3-15，其中蕴含部门扩增信号，导致曲线被压下去 。解决步骤：减幼基线终点，至Ct值前4个循环，沉新分析数据 。3）直线扩增曲线图3 某些样本出现直线扩增曲线原因：探针部门降解解决法子:建议更换试剂进行测试 。4）曲线平台期下掉原因：盖子没盖紧解决法子:PCR反映管盖子盖上后，查抄盖子是否盖紧 。图4 曲线平台期下掉
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